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FICHA DE PROYECTO DE INVESTIGACION EXPEDIENTE: 11010-00
 
TITULO: 
Vías inmunomoduladoras de la respuesta citotóxica específica en la infección por VHC
A�o de Finalizacion: 
Investigadores Centros
Larrubia Marfil , Juan RamónPrincipal
Palabras Clave
   

OBJETIVO: Analizar el efecto de diversas moléculas inmunomoduladoras positivas y negativas sobre la respuesta citotóxica específica frente al virus hepatitis C (VHC).
. DISEÑO: Se desarrollarán 3 estudios de investigación: - Estudio no experimental transversal analítico; - Estudio cuasi-experimental tipo pre-post; - Estudio no experimental tipo cohortes.
. ÁMBITO DEL ESTUDIO: Área de Salud de los Hospitales Universitario de Guadalajara, Ramón y Cajal de Madrid y Fundación Jiménez Diaz.
. SUJETOS DEL ESTUDIO: Sujetos con hepatitis crónica por VHC genotipo-1, con haplotipo HLA-A2+, A1+ o B35+ y que presenten infección crónica o resuelta tras tratamiento con IFN y ribavirina.
. INSTRUMENTALIZACIÓN: Técnicas de Biología Celular, Citometría de Flujo, expansiones clonales y técnicas de funcionalidad y muerte celular.
. DETERMINACIONES: Visualización de células CD8+ VHC específicas de sangre periférica e intrahepáticas: mediante tinción con anticuerpos (Ac) anti-CD8 y complejos pentaméricos HLA-I/epítopo. En estas células se analizará: 1) Fenotipo: tinción con Ac anti: PD-1, CTLA-4, Tim-3, OX40, 4-1BB, CD127, LAG-3, BTLA, CD244, GITR, Bim y Mcl-1. 2) Producción de citoquinas tipo-1: tinción intracelular de citoquinas y ELISA de sobrenadante de los cultivos. 3) Proliferación: marcaje con CFSE tras estimulación específica. 4) Citotoxicidad: tinción con Ac contra granizyma B, perforina a y CD107a y CD244 (2B4) 5). Proliferación y producción de citoquinas tipo-1 tras regulación in-vitro de las distintas moléculas inmunomoduladoras y/o bloqueo de la apoptosis.