Objetivo: 1. determinar la expresión de proteinas con actividad quinasa y vías de senalización intracelular activadas por ellas que se encuentran expresadas en cáncer de mama con fenotipo triple negativo. 2. estudiar la función oncogénica que tiene la expresión y activación de estas proteínas individualmente o en combinación en modelos celulares con fenotipo triple negativo. 3. estudiar efecto de su inhibición con siRNA o con inhibidores farmacológicos.
Metodología: 1. se seleccionarán aquellos tumores procedentes de pacientes que por inmunohistoquímica tengan un patrón triple negativo. 2. En estos tumores en fresco se realizará arrays de fosfoproteínas para identificar receptores de membrana con actividad tirosina quinasa que se encuentren activados. 4. posteriormente se estudiarán las vías de senalización intracelular activas por estas proteínas. 5. Una vez identificadas estas vías en muestras procedentes de pacientes, pasaremos a modelos in vitro para probar su papel oncogénico. Utilizaremos varias líneas celulares de cáncer de mama con patrón de expresión triple negativo. Para comprobar que estas líneas son un buen modelo para continuar nuestro estudio, comprobaremos mediante western-blot el estado de expresión y activación de estas proteínas y vías de señalización. 6. En estas líneas estudiaremos la función oncogenica que tienen estas vías mediante la inhibicion selectiva de proteínas implicadas en su señalización. Para ello utilizaremos productos farmacologicos comerciales asi como siRNA.